发酵生产中杂菌的检查与防治

1 

/ 

6 

第一节

发酵生产中杂菌的检查与防治

一染菌的检查与判断

凡是在发酵液或发酵容器中侵入了非接种的微生物统称为杂菌污染，与早发现杂菌，

与早采取相应措施，

对减少由杂菌污染造成的损失至关重要。

因此检查的方法要求准确、

快

速。目前发酵生产上常用的检查方法有下列几种：

1

．显微镜检查

一般单染色后用油镜观察，凡是从视野中发现有形态与生产菌株不同的菌体都可认为

是污染了杂菌。

优点：简便、快速，能与时检查出杂菌。

缺点：

（

1

）对固形物多的发酵液检查较困难；

（

2

）对含杂菌少的样品不易得出正确结论，应多检查几个视野；

（

3

）由于菌体较小，本身又处于非同步状态，应注意区别不同生理状态下的生产菌与

杂菌，必要时可用进行革蓝氏染色、芽孢染色等辅助方法进行鉴别。

2

．平板检查

若怀疑发酵液被细菌污染，可取少量待检发酵液涂布在肉汤平板上，在适宜条件下培

养，若出现与生产菌株形态不一的菌落，

就表明可能被杂菌污染；

若要进一步确证，可配合

显微镜形态观察，若个体形态与菌落形态都与生产菌相异，则可确认污染了杂菌。

优点：

（

1

）适于固形物多的发酵液；

（

2

）形象直观，肉眼可辩，不需仪器。

缺点：

（

1

）所需时间较长，至少也需

8

小时；

（

2

）无法区分形态（包括细胞形态与菌落形态）与生产菌相似的杂菌，如啤酒生产中

污染野生酵母时，

由于啤酒酵母与野生酵母很难从形态上加以区分，

只能借助生理生化试验

进行确认。

（

3

）检查过程需严格执行无菌操作技术。

3

．肉汤培养检查法

此法主要用于空气过滤系统和液体培养基的无菌检查。具体方法是将葡萄糖酚红肉汤

培养基（牛肉膏

0.3%

，蛋白胨

0.8%

，葡萄糖

0.5%

，氯化钠

0.5%

，

1%

酚红溶液

0.4%

，

pH7.2

）装在吸气瓶中，经灭菌后，置

37 

℃培养

24

小时，若培养液未变浑浊，表明吸气

瓶中的培养液是无菌的，

就可用于空气过滤系统的杂菌检查。

把过滤后的空气引入吸气瓶的

培养液中，

经培养后，

若培养液变混，

表明过滤后的空气中仍有杂菌，

说明过滤系统有问题，

若培养液未变混，说明空气无菌。

此法还可用于检查培养基灭菌是否彻底，取少量培养基接入肉汤中，培养后观察肉汤

的浑浊情况即可。

4

．根据发酵过程中的异常现象来判断是否染菌